在日常細胞實驗中,我們經常需要計算細胞濃度,以進一步確定接種濃度或細胞數量。盡管自動細胞計數儀提供了快速性,但對于某些細胞,尤其是那些處于復雜狀態的細胞,有研究表明其分析性能并不一致(對于細胞形態的識別,所采用的是不一樣的方法)。
在臨床實踐中,因血細胞自動計數儀通常無法精準地識別細胞形態,所以需使用經典的血細胞計數板進行儀器校準。利用顯微鏡手動進行細胞計數,這種方法已經被廣泛認可[]。
血細胞計數板規格及計數原理
血細胞計數板是一種經典的細胞計數工具,具有上下兩個計數池。
在其上方覆蓋蓋玻片,形成深度為0.10mm的計數池。每個計數池分為9個大格,每個大格的規格為1.00mm×1.00mm。因視野所限,不易操作,容易造成較大誤差,所以一般采用定點(計數室4個角的大方格)取樣計數。(直徑較小的細胞如紅細胞,采用中間一個大方格內標準5個區域采集計數)
細胞濃度=(四個大方格的細胞數之和)/4×稀釋倍數×104個Cell/mL
博大博聚細胞計數儀的計數之道
博大博聚細胞計數儀,沿用經典血細胞計數板的計數原理進行研制(JJG 552-1988 血細胞計數板試行檢定規程),并可搭載一次性細胞計數片,其細胞計數片與標準血細胞計數板的計數池高度相同。①在使用血細胞計數板計數時,儀器相當于一個自帶電腦的自動化顯微成像系統,屏幕能夠提供細胞高清圖像的實時預覽,精密的三軸聯動控制系統,實現目標視野的精準走位,實時自動調焦,保證圖片的清晰度,并通過算法自動進行識別與計數。
②在使用一次性細胞計數片時,儀器屏幕會顯示虛擬刻線,刻線對應的實際大小經“仿細胞校準板(發明專利號:ZL 2020 21855359.4)”嚴格標定,與血細胞計數板上的刻線面積(1*1mm2)一致。
③一次性細胞計數片的空腔高度設計嚴格標定為0.1mm,計數體積(0.1mm3)與血細胞計數板一致。
④在兩種耗材上,博大博聚細胞計數儀都采用標準的濃度計算公式,細胞濃度=(四個大方格的細胞數之和)/4×稀釋倍數×104個Cell/mL。
這使得博大博聚計數儀能夠實現計數結果人工核對。
注意:個別型號不做兼容血球計數板的設置,但是設計原理完全相同(具體信息請咨詢博大博聚科技有限公司)
博大博聚的細胞計數新范式
博大博聚細胞計數儀支持非染色(發明專利號ZL 2013 1 0101403.0)、臺盼藍染色和熒光染色等多種計數模式。
儀器預設多種細胞樣本類型,對于更復雜的細胞樣本,可通過自定義輔助判讀,以尋找最適合不具代表性樣本的識別參數并可無限新增。
無論是秉持傳統方法還是融合創新思路,博大博聚計數儀都旨在為細胞計數和分析提供更全面的解決方案。
參考文獻:
[1] .Borzova E. The Absolute Basophil Count. Methods Mol Biol. 2020;2163:109-124.
[2] Zhang M, Gu L, Zheng P, et al. Improvement of cell counting method for Neubauer counting chamber. J Clin Lab Anal. 2020;34:e23024.